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用DNA连接酶把被限制性核酸内切酶Ⅰ（识别序列和切点是－↓GATC－）切割过的质粒和被限制酶Ⅱ（识别序列和切点是－G↓GATCC－）切割过的目的基因连接起来后，该重组DNA分子如右图所示，该重组DNA分子能够再被限制酶Ⅱ切割开的概率是试题及答案-单选题-云返教育
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用DNA连接酶把被限制性核酸内切酶Ⅰ（识别序列和切点是－↓GATC－）切割过的质粒和被限制酶Ⅱ（识别序列和切点是－G↓GATCC－）切割过的目的基因连接起来后，该重组DNA分子如右图所示，该重组DNA分子能够再被限制酶Ⅱ切割开的概率是
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B
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单克隆抗体的优点
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（8分）继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：⑴获得目的基因的方法通常包括 和 。⑵获得目的基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”）⑶进行基因转移时，通常要将外源基因转入 中，原因是 。⑷由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率 ，所以在转化后通常需要进行 操作。?
（7分）植物细胞受损后通常会释放出酚氧化酶，使无色的酚氧化生成褐色的物质。例如，酚氧化酶可引起果蔬酶促褐变，也是引起果汁褐变的最主要因素。请据资料分析回答：（1）酚氧化酶与酚类底物分别储存在细胞的不同结构中。能实现这样的分类存放是因为细胞内具有 系统,组成该系统的结构具有的功能特性是 。（2）把含有酚氧化酶的提取液作如下表的处理， 完成下列问题：步骤试管①酚氧化酶提取液的处理②加入缓冲液③加入酚类底物实验后的颜色A不作处理2ml2ml褐色B加入蛋白酶，10分钟2ml2ml无色C加入三氯乙酸(强酸)，10分钟2ml2ml ？ 推测实验后，试管C中的颜色是 。试管A、C对照，你能提出什么结论？ 。试管A、B对照，说明酚氧化酶的化学本质是 。（3）基因工程已应用在抗褐变品种的改良上，目前比较成功的是反义RNA技术（反义RNA可直接作用于靶MRNA的SD序列和部分编码区，直接抑制翻译）。有人将一段cDNA片段通过 的方法导入马铃薯的细胞中，并表达得到反义的RNA，结果块茎中的酚类物质氧化受阻，表皮被擦破后不发生褐变。你认为反义RNA发挥作用的原因可能是 ，阻碍了翻译过程的进行。?
肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图一请回答有关问题。⑴进行过程①时，需用 酶切开载体并用 酶连接以插入let7基因。（2）重组载体的基本组成成分包括 (3)进行过程②时，需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。(4)研究发现，let7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图二。据图分析，可从细胞中提取 进行分子杂交，以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 含量减少引起的。?
降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：(1)Klenow酶是一种 酶，合成的双链DNA有 个碱基对。(2)获得的双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点—G↓AATTC—)和BamHⅠ(识别序列和切割位点—G↓GATCC—)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它 。②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是 。③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有 。(3)经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是 。(4)上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是 。?
菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花，培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答：（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感）（1）质粒是基因工程中最常用的载体，此外还可用 作为运载体。（2）为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可在低温下，用 处理，使其处于感受态。（3）将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及 的固体培养基中，在适宜条件下进行培养，初步筛选转基因菊花。（4）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2 龄幼虫，实验结果如下表所示。请据表回答：①对照组应饲喂等量的 。②据表分析， 差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。?
除草剂草甘膦会把普通大豆植株与杂草一起杀死。科学家从抗草甘膦的矮牵牛中分离克隆出EPSP合成酶基因，培育出了抗草甘膦的转基因大豆，从而大大降低了田间管理成本。抗草甘膦转基因大豆培育过程如图所示。请分析回答有关问题。(1)科学家在进行上述操作时，通常要用同一种 分别切割质粒和含目的基因的DNA以获得相同的黏性末端，质粒的黏性末端与目的基因两侧的黏性末端就可通过 而黏合。这一过程体现了质粒作为运载体必须具备的条件是 。(2)转基因时往往需对EPSP合成酶基因进行扩增，所利用的技术是 ，利用的原理是 。基因工程的基本步骤包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、 、目的基因的检测与鉴定。构建基因表达载体时，一般在基因表达载体中插入特异性表达的启动子，另外还应含有目的基因、 、 等。最后步骤是目的基因的检测与鉴定，在此步骤可进行分子水平的检测，可检测的物质有 、 、 。(3)与诱变育种、杂交育种相比，通过基因工程培育新品种的主要优点是 。图中利用组织培养培育出转基因大豆完整个体所依据的生物学原理是 。?
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