• 干扰素在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,几乎能抵御所有病毒引起的感染。传统生产方法成本高、产量低,获得的干扰素在体外不易保存。用生物技术手段可以缓解这些问题。请回答相关问题。(1)利用基因工程生产干扰素,过程是:①从健康人体的外周静脉血分离能合成干扰素的免疫细胞,从中提取 ,经反转录获取目的基因。②用限制酶处理载体和目的基因后,用DNA连接酶处理,形成基因表达载体,该载体的化学本质是 。③若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是用Ca2+ 处理,使其成为 ,在一定温度条件下完成转化。④在培养液中培养一段时间后,离心后取 (答“上清液”或“菌体”),经进一步处理获得产物,进行产物鉴定时可采用 技术。(2)利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:预期蛋白质功能→ → →找到对应的脱氧核苷酸序列。(3)利用细胞工程生产干扰素,设计思路是:将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选出 ,经细胞培养可获得大量干扰素。试题及答案-解答题-云返教育

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      干扰素在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,几乎能抵御所有病毒引起的感染。传统生产方法成本高、产量低,获得的干扰素在体外不易保存。用生物技术手段可以缓解这些问题。请回答相关问题。
      (1)利用基因工程生产干扰素,过程是:
      ①从健康人体的外周静脉血分离能合成干扰素的免疫细胞,从中提取
      ,经反转录获取目的基因。
      ②用限制酶处理载体和目的基因后,用DNA连接酶处理,形成基因表达载体,该载体的化学本质是
       
      ③若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是用Ca
      2+ 处理,使其成为  ,在一定温度条件下完成转化。
      ④在培养液中培养一段时间后,离心后取
        (答“上清液”或“菌体”),经进一步处理获得产物,进行产物鉴定时可采用  技术。
      (2)利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:
      预期蛋白质功能→
          →找到对应的脱氧核苷酸序列。
      (3)利用细胞工程生产干扰素,设计思路是:将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选出
          ,经细胞培养可获得大量干扰素。

      试题解答


      见解析
      (1)反转录是以信使RNA为模板,通过反转录酶,合成DNA的过程。从免疫细胞中提取的是mRNA。载体是将目的基因转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子,最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。将目的基因导入微生物细胞,最常用的是大肠杆菌,其转化方法是:先用Ca2+ 处理,使其成为感受态细胞,再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。培养一段时间后,离心后取菌体,经进一步处理获得产物,鉴定采用技术是抗原-抗体杂交。
      (2)蛋白质工程的流程是:预期蛋白质功能→设计预期蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列。
      (3)动物细胞融合技术中,细胞融合后会出现3融合细胞,B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞、杂交瘤细胞,需要经过选择性培养基筛选出所需要的杂交瘤细胞,即能产生特异性的干扰素,又能无限繁殖。

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